Xét nghiệm độc tế bào phụ thuộc kháng thể để phát hiện kháng thể trung hòa Ocrelizumab

Ocrelizumab (OCREVUS®) là kháng thể đơn dòng kháng CD20 được nhân hóa, được phê duyệt để điều trị cho bệnh nhân trưởng thành mắc bệnh đa xơ cứng tái phát (RMS) và đa xơ cứng tiến triển nguyên phát (PPMS). Tại đây, chúng tôi thảo luận về các cân nhắc chiến lược và kỹ thuật cần thiết để phát triển xét nghiệm kháng thể trung hòa (NAb) dựa trên độc tế bào phụ thuộc kháng thể (ADCC) vững để phát hiện NAb kháng ocrelizumab ở bệnh nhân tham gia các thử nghiệm lâm sàng có đăng ký ocrelizumab. Xét nghiệm phát hiện NAb bao gồm hai tầng: xét nghiệm sàng lọc và xét nghiệm xác nhận. Trong xét nghiệm sàng lọc, mẫu bệnh nhân được phân tích trong sự hiện diện của ocrelizumab. Các mẫu dương tính trong xét nghiệm sàng lọc sau đó được phân tích trong xét nghiệm xác nhận, trong đó một mAb kháng CD20 khác là obinutuzumab thay thế ocrelizumab để xác minh tính đặc hiệu của NAb. Cả hai xét nghiệm sử dụng tế bào MEC-2, một dòng tế bào bạch cầu B mãn tính, được đánh dấu trước bằng calcein AM làm tế bào đích, và tế bào diệt tự nhiên (NK) được biến đổi gen để biểu hiện ổn định thụ thể Fc gamma IIIa_ F158 làm tế bào effector.